马尾松针叶含贝壳杉酸-19-甲醚、南洋杉酸、松香酸、鞣酸、α-及β-胡萝卜素、维生素B₁、B₂、C、E、K等，有祛风止痛、活血消肿、明目、安神的功效，^〔1〕云贵高原大部分地区有丰富的马尾松资源，具有一定的开发价值。目前尚无对马尾松针叶的毒性研究报道。为此，我们对其急性毒性及致突变性进行了实验研究。

　　1　材料与方法

　　1.1　材料

　　1.1.1　受试物　新鲜马尾松针叶400 g，蒸馏水2 500 mL煮沸30 min，水浴蒸发浓缩至400 mL为提取液，即1 mL浓缩液相当于1 g马尾松针叶。

　　1.1.2　实验动物　昆明种小白鼠，中国科学院昆明动物研究所提供。

　　1.1.3　Ames试验菌株　华西医科大学毒理研究室提供。

　　1.2　方法　参照卫生部《食品安全性毒理学评价程序和方法》^〔2〕中介绍的方法。

　　1.2.1　急性毒性LD₅₀的测定　经预试，该受试物对雌雄小白鼠毒性无显著性差异。选用18～22 g小白鼠20只，雌雄各半，随机分为4组，每组雌雄皆有，按Horn氏法测定雌雄混合小白鼠LD₅₀，其提取液剂量系列为21.5、10.0、4.64、2.15 g/kg BW，经口灌胃染毒，观察7 d，同时记录中毒症状。

　　1.2.2　Ames试验　采用平板参入法，测试菌株为TA97、TA98、TA100、TA102，经鉴定各种生物学特性均合乎要求。受试物提取液剂量为10 000、1000、100、10 μg/皿，同时设溶剂蒸馏水和阳性剂对照，并在加和不加S9混合物的条件下分别进行测试。

　　1.2.3　骨髓细胞微核试验　选用25～30 g小白鼠50只，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。试验组给予提取液1.25、2.5、5.0 g/kg BW 3个剂量的受试物。另设阴性对照(蒸馏水)和阳性对照(环磷酰胺40 mg/kg BW)，经口两次灌胃染毒，两次间隔24 h，于第二次给受试物后6 h处死动物，取胸骨骨髓涂片，甲醇固定，Giemsa染色，每只小鼠计数1 000个嗜多染红细胞(PCE)中出现的微核细胞数，计算微核细胞率(%)。

　　1.2.4　精子畸形试验　选用25～30 g雄性小白鼠25只，随机分为5组，每组5只。设3个剂量组，1个阴性对照组(蒸馏水)，1个阳性对照组(环磷酰胺40 mg/kg BW)，连续5 d经口灌胃染毒，于末次染毒后30 d处死动物，取双侧附睾制片，每只小鼠计数1 000条精子，观察畸形数和畸形类型，计算畸形率(%)。

　　2　结果与讨论

　　2.1　急性毒性　马尾松针叶提取液4个剂量组均未见中毒症状表现，无动物死亡。据此推测其雌雄小鼠混合LD₅₀＞10 g/kg BW。

　　2.2　Ames试验结果　不论加与不加-S9混合物，各剂量组的回变菌落数与溶剂对照组的回变菌落数之比(MR)均小于2，而阳性对照组与溶剂对照组的回变菌落数之比大于2，该受试物无诱导TA97、TA98、TA100、TA102回复突变能力，见表1。

　　表1　马尾松针叶水提取液Ames试验结果　　　　　( ±s)